大肠癌术后患者中医证型临床分布及分子谱分析

研究看点

不同证候对大肠癌预后的影响不同，可能与不同的mRNA表达水平有关。初步发现湿热证组某些癌基因和促炎细胞因子高表达，而其他证型表达不明显，湿热证组预后较差。

背景

积聚病记载于中医古籍《诸病源候论》中，以腹痛、大便散、腹部包块等为特征，与西医结直肠癌的临床症状相似。到目前为止，大肠癌是世界上最常见的癌症之一。目前，手术切除是早期大肠癌患者的主要治疗策略，然而，约40%的Ⅱ期或Ⅲ期大肠癌患者术后可能复发。因此，寻找有效的预后因素，提高大肠癌患者的整体生存率是一个重要的课题。

中医强调环境与人体的整体观念。对于癌症患者来说，中医药是最常见的辅助和替代疗法之一。中医学以辨证论治为基础，辨证论治包括观察、听诊、问诊、脉诊四个环节。证候是反映疾病某一阶段的体征和症状的一种病理形态。因此，中医证候是中医方剂最基本的指导原则，也是大肠癌中医治疗的重要分类。结直肠癌患者在诊断不同证型时，应采用不同的中药方剂治疗。然而，当中医学与现代医学相结合时，对证候的分子基础和证候的有效性却知之甚少。因此，明确中医证候的生物学基础将有助于大肠癌患者的临床诊断和治疗。

在本研究中，我们假设证候的识别对大肠癌患者有不同的影响，这可能与不同的mRNA表达水平有关。进而验证这一假设，为大肠癌不同中医证型的分子基础研究提供新认识。

方法

健康对照组30例，结直肠癌患者80例，其中脾气虚证33例，湿热证23例，血瘀证17例，其他证型7例。从外周血单个核细胞中提取人mRNAs。应用基因芯片和qRT-PCR检测不同中医证型大肠癌患者的基因表达。

结果

1）脾虚、湿热、血瘀是大肠癌患者最常见的证候。

图2 CRC患者的证侯分布和预后

注：（A）大肠癌中医证候的临床分布；(B）不同证型大肠癌患者的预后；SQD：脾虚；DH：湿热；BS：血瘀。

2）三组CRC患者的基因表达谱分析

脾气虚证、湿热证和血瘀证组的mRNA表达水平（尤其是PIK3CA、STAT3、SOX9和KDM5C）存在显著差异。脾虚组JNK1、TP53、MLH1、MSH6、PMS2、SOCS3、TCF7L2、FAM123B、PSAP、FBXW7、SALL4的mRNA水平较高，炎症细胞因子IL-6的表达较低。湿热证组KRAS、MUC16、EGFR、GRASP65、PIK3CA、MAPK7、CD24、STAT3、SLC11A1、Bcl-2、TXNDC17及部分炎性细胞因子（IL-6、IL-23、TNF-a、CXCR4）mRNA水平均高于其他证型。血瘀证患者血清中SOX9、MLH1、MSH6、KDM5C、PCDH11X、PSAP和SALL4表达增高，PIK3CA、CD24、STAT3、CXCR4、TXNDC17和TP53 mRNA水平降低。结直肠癌湿热证患者预后较其他证型差。

图2 CRC患者中医证候的分子基础

注：（A）应用基因表达芯片检测脾气虚证、湿热证、血瘀证及对照组大肠癌血样mRNA表达谱；(B）qRT-PCR证实PIK3CA、STAT3、SOX9和KDM5C的mRNA表达水平，a、PIK3CA与其他证型比较，P<0.001；b、STAT3与其他综合征比较，P<0.001；c、SOX9与其他综合征比较，P=0.001；d、KDM5C与其他综合征比较，P<0.001。

结论

不同证候对结直肠癌预后的影响不同，可能与不同的mRNA表达水平有关。某些癌基因和促炎细胞因子在湿热证组中高表达，而在其他证型中无表达，提示湿热证患者预后不良。初步揭示了大肠癌预后证候差异的分子基础，为中医药治疗大肠癌提供了更好的认识。